流感研究—国外筛选抗流感病毒植物药的实验方法

体外实验
　　体外实验又分抑制病毒复制试验、细胞存活率与受损程度试验、膜融合试验、蛋白质合成作用试验、RNA合成作用试验及唾液酸酶活性试验。
　　抑制病毒复制试验是检验植物药能否减少流感病毒的复制生长的一种试验，测定方法是把流感病毒和细胞一起培育，然后加人植物药，再与对照组比较，观察加人植物药的试验组是否产生较少的空斑形成、产生较小程度的红细胞凝集作用、降低唾液酸酶的活性。
　　细胞存活率与细胞受损程度试验是让细胞与流感病毒接触，经过一段时间后在显微镜下观察细胞受损害的程度，比较以植物药处理和对照试验的细胞经流感病毒感染后的存活率或生长情况，便可知道该植物药是否能减少病毒对细胞的损害。
　　膜融合试验主要是测试药物能否抑制病毒与膜的融合能力，当荧光标记的病毒与人工制的脂质体融合后荧光会增加，荧光强度的改变可以作为融合作用的指标，如果病毒与脂质体融合作用减低，则可推断病毒与细胞膜融合能力减少。
　　蛋白质合成作用试验是利用同位素标记物甲硫氨酸掺入作指标，比较试验组和对照组的HA、NA和核蛋白的蛋白质合成作用。
　　RNA合成作用试验是使用同位素标记物尿昔三磷酸掺入作指标，进行凝胶电泳和放射自显影术。
　　唾液酸酶活性试验是利用PNP－NeuAc作为底物，测定在 405 urn的吸光率，并计算对硝基苯酚（PNP）的释出量，以此作为唾液酸酶活性的指标。

动物体内实验
　　动物体内实验方法一般采用鼻内喷淋方式把流感病毒送入动物（如小鼠）的呼吸道，呼吸道是最常感染流感病毒的地方。实验组用鼻内喷雾方式送人植物药（腹腔内或皮下给药方式亦有人采用），定时记录动物的存活率，亦可经过一段时间后取得实验组和对照组动物的肺脏，制备匀浆，测定其中病毒的红细胞凝集作用和唾液酸酶活性，作为比较病毒数量或活性的指标。

鸡胚培养
　　鸡胚培养是把病毒接种到鸡蛋内的尿囊腔中培养，实验组的鸡蛋内加人植物药，经过一段时间后（如48 小时），取出尿囊液，测定病毒的数量或活性。

预防和治疗效果实验
　　预防和治疗效果的实验方法是使细胞或动物先接受植物药的处理，再行接触流感病毒，观察植物药能否增加细胞或动物对抗流感病毒的能力。

　　本版内容来源于中医药文献数据库。